血液細胞分析儀出現的最多的問(wèn)題就是堵孔問(wèn)題，以下給大家分析了幾乎所有引起堵孔問(wèn)題的原因。
1．堵孔的發(fā)生跟采血的手法是否正確操作有關(guān)
攜帶大量的上皮細胞組織或者棉絮纖維都很容易堵孔，也很難排除，在大直徑的孔有時(shí)候會(huì )看到棉絮等物質(zhì)，像F820很多醫院都在反沖的時(shí)候見(jiàn)到大團的棉絮從孔中沖出，這就是很好的例證，無(wú)論全自動(dòng)還是半自動(dòng)這樣的問(wèn)題大多出現在預稀釋標本中，全血標本幾乎沒(méi)有。
2．抗凝出現問(wèn)題
要么是抗凝比例不對（過(guò)高會(huì )導致衛星現象，顯微鏡下能看到大細胞的周?chē)l星很多小細胞，造成細胞體積巨大而且還很難溶解），放置時(shí)間過(guò)短也是原因之一，這也是在25分鐘之內測試分類(lèi)不好血小板不穩的重要原因，EDTA抗凝劑與血小板凝血因子反應結合需要時(shí)間，這個(gè)時(shí)間隨著(zhù)溫度的升高而縮短，這也就是天氣變冷的時(shí)候容易出現問(wèn)題的原因。
3．凝血和混勻
血液凝固，混勻不好，抗凝劑使用不正確（枸櫞酸鈉、草酸等非血常規抗凝劑長(cháng)時(shí)間使用會(huì )導致堵孔），這些想必大家都知道。
以上這些常識性的東西大家都很清楚，這些情況一次沒(méi)有掌握或者處理好不會(huì )當時(shí)或者這個(gè)標本做完后就造成堵孔，而是有個(gè)時(shí)間的累計，多次出現上述情況才會(huì )發(fā)生的。下面還有幾種機理：
4．WBC通道的堵孔機理
溶血劑問(wèn)題，溶血不足是主要原因，要注意的是明顯的溶血不足會(huì )顯示出HGB的增高和WBC的上升，很容易給人們警示，這里說(shuō)的是輕微溶血不足，在WBC和HGB上看不出數值的變化或者很輕微，WBC圖形上淋巴峰值前會(huì )有不規則上升曲線(xiàn)，這就要引起足夠的警惕了，一般這種情況出現，30天之內就會(huì )發(fā)生嚴重的堵孔。主要原因是溶血劑破壞紅細胞不完全或者紅細胞碎片發(fā)生粘連聚集造成的，這種情況持續長(cháng)時(shí)間就會(huì )在小孔上附著(zhù)，小孔上附著(zhù)這些細胞碎片以及蛋白沉積就會(huì )像蓋房子的水泥一樣，一層一層的越積越厚，等懷疑可能堵孔再做濃縮清理就已經(jīng)很難清除了。稀釋液?jiǎn)?wèn)題，稀釋液的理化指標不合格，造成細胞無(wú)法正確稀釋間隔，游離不好就會(huì )造成細胞聚集，在直方圖上表現明顯，但出現堵孔問(wèn)題往往在直方圖上無(wú)法看出問(wèn)題，原因是更換試劑時(shí)都作了相應的靈敏度和增益的調整，在定標系數上也作了相應的調整，這樣在直方圖上根本無(wú)法看出問(wèn)題所在，更換理化指標稍好的稀釋液就會(huì )發(fā)現直方圖明顯的變化，這一點(diǎn)要引起重視，這些試劑往往是銷(xiāo)售區域很小的廠(chǎng)家的產(chǎn)品，銷(xiāo)售醫院不多，且設備的養護也都是以保修名義自己承擔的。
5．BC通道的堵孔機理
血液標本經(jīng)過(guò)成千上萬(wàn)倍的稀釋后在紅細胞計數池進(jìn)行電阻法計數，在稀釋過(guò)程中除了稀釋液沒(méi)有其他的試劑干預。大家知道白細胞池經(jīng)過(guò)溶血劑的作用能多少消除一些蛋白和碎片的干擾，而且往往是分配了白細胞的標本且加入溶血劑和氣泡之類(lèi)混合后才開(kāi)始在紅細胞池進(jìn)行分配和稀釋的，而白細胞和紅細胞池是同時(shí)計數的，這樣紅細胞池的蛋白碎片懸浮活動(dòng)力就要高于白細胞池，而且從比例上講這些蛋白和碎片的比例也要高于白細胞池，這就是紅細胞堵孔的一個(gè)主要原因。
6．負壓不足
有人說(shuō)負壓不足會(huì )報警的。要知道儀器的報警電路都是有一個(gè)范圍的，長(cháng)期處于負壓下限，或者認為調整了負壓報警限制都會(huì )導致實(shí)際負壓不足。負壓不足導致堵孔的原因很好理解，大家都知道自來(lái)水是靠水泵來(lái)提供足夠的壓力供給千家萬(wàn)戶(hù)的，沒(méi)聽(tīng)說(shuō)自來(lái)水管道會(huì )堵或者管道內壁有什么附著(zhù)物，但下水道往往都是靠自然高度排出的，水流的速度自然很低，這就給下水管道內壁附著(zhù)提供了很好的條件，所以大家看到的是下水管道內壁污垢很厚。在血液分析儀上，負壓不足就會(huì )給蛋白、碎片附著(zhù)在小孔上提供了有利的條件。所以，計數負壓，排空負壓的監測調整一般在上限好一些，這樣留有的余地會(huì )大一些。經(jīng)常有人說(shuō)小孔沒(méi)有堵，我處理過(guò)也檢查過(guò)，絕對可以肯定，但為什么就是報堵孔或者現象就是堵孔呢，先前這個(gè)問(wèn)題問(wèn)得最多的就是F820，其實(shí)就是負壓不足造成的。
7．清洗劑問(wèn)題
清洗劑的作用是清除小孔和管道的蛋白、碎片附著(zhù)，如果清洗劑效果不好就起不到應有的作用，勢必造成久后堵孔，這些清洗劑往往是每標本測試后都要用到，理化指標太高就會(huì )造成清洗劑的泡沫或者其他成分清理不干凈 反而會(huì )影響計數，理化指標太低，起不到效果，這也就是清洗劑僅次于稀釋液復雜程度的原因，國內試劑配套往往是模仿，很少有人去做基礎驗證和證據分析。還有的儀器沒(méi)有普通的清洗劑，只有濃縮清洗劑，這種清洗劑往往被人用次氯酸鈉替代了，過(guò)濾不好甚至根本就沒(méi)有過(guò)濾反而會(huì )造成大顆粒堵孔，沖洗不干凈會(huì )影響計數，而且會(huì )腐蝕管道和相關(guān)池、閥、泵等部件。有些儀器不僅有普通清洗劑，還有濃縮清洗劑，更有其他名目的清洗劑，分別在不同的部件上使用。遇到一個(gè)客戶(hù)關(guān)機前使用濃縮液后，第二天再開(kāi)機反而本底很久不能通過(guò)，試劑都是儀器廠(chǎng)家的，我看了一下，醫院由于嫌稀釋血結果不可靠，都采用全血測試，就告訴他們，每天關(guān)機不要采用濃縮液連續一周，均沒(méi)有發(fā)生早上開(kāi)機不通過(guò)現象，然后隔一天用濃縮液，就發(fā)現使用濃縮液的第二天就會(huì )本底不過(guò)，至于這批濃縮液出了什么問(wèn)題我們不追究，這里僅給大家一個(gè)考慮問(wèn)題的思路。還有的所謂濃縮液不用還好點(diǎn)兒，用上了不久反而會(huì )堵孔，當然，這些都需要反復驗證才可以結論。
?。福僮髟O置問(wèn)題
這里以ABX MICROS60為例，先說(shuō)一下這個(gè)設備的清洗機理，首先是每次計數結束時(shí)的清洗，在計數結束后，負壓泵排掉計數池廢液，然后打開(kāi)4號閥讓清洗劑通過(guò)4號閥，兩個(gè)計數池的后池，再通過(guò)6號閥進(jìn)入負壓泵，時(shí)間很短，流過(guò)的清洗液官方說(shuō)法0.85ml，非常少，然后分配泵上抬，將稀釋液通過(guò)11，7號閥的動(dòng)作沖洗兩個(gè)后池，清洗由清洗劑清洗過(guò)的管道，這樣就完成了一次清洗，這一切都非?？?，不超過(guò)3秒鐘完成的。
注意的有兩點(diǎn)，一，不是所有的版本都有這個(gè)功能，只有02年后的1.4版本和1.6版本的才有，二是清洗順序是白細胞到紅細胞的后池，清洗完白細胞后池后的清洗劑再清洗紅細胞的后池，這就給沉積附著(zhù)提供條件，也是紅細胞嚴重堵孔比白細胞多而且嚴重的原因。但這不是唯一的原因，下面還要說(shuō)明，這個(gè)儀器有一個(gè)自動(dòng)清洗功能就是AUTOCLEARN，這個(gè)動(dòng)作是這樣的，清洗液通過(guò)4號閥經(jīng)過(guò)兩個(gè)計數池的后池再通過(guò)6號閥進(jìn)入負壓泵，（這個(gè)時(shí)候兩個(gè)計數池已經(jīng)完全排空），通過(guò)時(shí)間定量大概吸取了7.6ml停止，然后通過(guò)12號閥將清洗液注入白細胞池，也是通過(guò)時(shí)間定量控制注入到白細胞池的有效容量是3ml，然后再吸取7.6ml的清洗劑，通過(guò)13號閥將清洗液注入紅細胞池3ml，之后，負壓泵排空后上拉，通過(guò)6號閥從兩個(gè)池子的小孔吸取10秒鐘的清洗劑，然后下壓，再將剛才吸取的清洗劑通過(guò)兩個(gè)小孔注入回計數池，這就是正反沖，這個(gè)過(guò)程一共2次，然后開(kāi)始排空清洗劑，用稀釋液進(jìn)行全面的清洗，這樣自動(dòng)清洗就完成的，這個(gè)動(dòng)作是無(wú)可挑剔的。
但問(wèn)題有兩個(gè)：
第一，如果清洗劑質(zhì)量不好也就達不到效果，而且管路中任何一個(gè)地方泄漏都會(huì )造成空氣進(jìn)入，也就是說(shuō)吸入的是空氣和清洗劑的混合體，特別是清洗劑用完更換試劑后沒(méi)有灌注，管道中有很長(cháng)一段是空氣，還有就是漏氣造成的清洗劑無(wú)法長(cháng)久保持在4號閥口，時(shí)間一長(cháng)會(huì )慢慢回落到清洗劑瓶中，形成氣拴。這樣在吸取清洗劑的時(shí)候由于時(shí)間定量，在規定的時(shí)間內并沒(méi)有達到預定的吸取量，在注入計數池的時(shí)候會(huì )無(wú)法注入足夠的清洗劑到計數池，在正反沖的時(shí)候也就形成空氣在正反沖而不是清洗劑，這種情況也會(huì )造成清洗劑注入計數池的飛濺，導致腐蝕部件特別是上面的按鍵液晶板。
第二，程序設置問(wèn)題，也就是多少測試進(jìn)行一次自動(dòng)清洗的問(wèn)題，儀器的默認是50次測試自動(dòng)進(jìn)行一次，這對于日標本量超過(guò)100的單位來(lái)說(shuō)沒(méi)有問(wèn)題，一天可以有2次以上的沖洗，但對于一天的標本量不足50的單位來(lái)說(shuō)，也就意味著(zhù)永遠也不會(huì )有自動(dòng)清洗。所以，根據使用者的具體情況設定這個(gè)間隔，10-50次任意設置，前提只有一個(gè)，一定要保證每天有2-4次正反沖的自動(dòng)清洗，這樣會(huì )大大降低堵孔概率。實(shí)際上有很多對比的例子，我給市內安裝儀器的時(shí)候往往講解得比較詳細，這些設定都交給他們自己處理，而給鄉鎮安裝的時(shí)候就很少說(shuō)這些，他們的標本非常少，我都是直接給他們設定到10次自動(dòng)沖洗，而且明確告訴每天關(guān)機必須STANDBY，這樣試劑浪費點(diǎn)但不出問(wèn)題，他們也感覺(jué)不出來(lái)頻繁沖洗帶來(lái)的麻煩，呵呵，本來(lái)標本就少嘛。濃縮試劑告訴他們是堵孔或者本底就是不過(guò)的時(shí)候再用，結果3年下來(lái)居然一次都沒(méi)用，也沒(méi)有堵孔發(fā)生，每次采購試劑干脆就不進(jìn)濃縮液了。而在市內的這幾家為了節省時(shí)間干脆將自動(dòng)清洗間隔到90甚至更多，就算自動(dòng)清洗也給按ESC取消了，每天關(guān)機也是直接把電源關(guān)掉，根本沒(méi)有關(guān)機步驟，這樣就大大減少了清洗劑正反沖小孔的沖刷清潔作用，一旦堵孔也就是濃縮液處理一下馬上進(jìn)行標本或者質(zhì)控測試，只要在控就不理睬了，其實(shí)這樣會(huì )越積越重，頑固性堵孔往往就在這類(lèi)單位發(fā)生。所以自動(dòng)清洗的間隔一定要保證每天有2-4次為佳，還有就是關(guān)機必須要個(gè)操作，執行STANDBY，這個(gè)動(dòng)作與自動(dòng)清洗完全一樣，只不過(guò)不進(jìn)行清洗液的排空，而是保留清洗液直到下次開(kāi)機STARTUP的時(shí)候才排空，所以，這個(gè)清洗劑如果理化指標太高，雖然清洗效果好，但對計數池的損傷也很大，HGB透光性不好或者池子發(fā)毛報廢，除了濃縮液的頻繁使用外這也是主要原因。
?。梗霈F輕微堵孔
除了濃縮浸泡池子小孔外，就是要檢查負壓和閥，注意，HGB和WBC公用一個(gè)池子的結構盡可能的不要全池用濃縮液或者次氯酸鈉浸泡，以免長(cháng)時(shí)間這樣做損傷池子從而影響HGB ,可以用注射器吸取次氯酸鈉溶液換上吸樣頭通過(guò)后池的管道正反沖小孔然后盡快的排空池子，這樣對池子的損傷就很小了。嚴重的堵孔可以先用注射器從后池用空氣正反沖，完全打通小孔通路，再用次氯酸鈉或者濃縮液正反沖，實(shí)在是很?chē)乐氐木鸵鹦断聛?lái)用超聲波振蕩器處理了。
1０．儀器沒(méi)有自動(dòng)清洗一定要掌握一個(gè)原則
就是把一天的標本量平均分成2-4部分，中間加濃縮清洗，一般50次是各個(gè)廠(chǎng)家的統一要求，每個(gè)儀器都有清洗功能，達到這個(gè)數量就手工執行一次，不要等出現問(wèn)題再忙活，那樣就晚了，這樣的清洗就是幾塊錢(qián)幾分鐘的事情，沒(méi)有必要節省這些，否則維修一次就幾十倍于此。還有就是質(zhì)控的跟進(jìn)，除了每天開(kāi)機后的質(zhì)控外，標本測試過(guò)程中每隔一定的標本就要跟一個(gè)質(zhì)控測試，時(shí)刻監測儀器狀態(tài)，這樣輕微的堵孔負壓不足的問(wèn)題也就能及時(shí)發(fā)現了，很多大的醫院都是每50個(gè)測試跟一個(gè)質(zhì)控，各個(gè)醫院根據自己的情況決定，維修工程師在維修結束或者查找問(wèn)題的時(shí)候，可以選擇一個(gè)較大的測試區間內分別設置質(zhì)控監測來(lái)判斷問(wèn)題的所在也是很好的辦法。
1１．說(shuō)一句題外話(huà)
判斷一個(gè)試劑的好壞不能從一兩天或者幾個(gè)標本幾個(gè)質(zhì)控來(lái)判斷，需要綜合的數據統計和圖形、維修故障點(diǎn)，維修概率來(lái)考量的，作為維修工程師要做的是找出問(wèn)題所在，就算一個(gè)箱或者一瓶試劑被充分證實(shí)有問(wèn)題，也不要下結論這個(gè)廠(chǎng)家甚至所有的類(lèi)似試劑都有問(wèn)題，國產(chǎn)試劑本來(lái)就步履維艱，難以完成原始積累也就無(wú)法進(jìn)行技術(shù)上的提高，在拚價(jià)格拚市場(chǎng)的同時(shí)，質(zhì)量也是他們所重視的，可能會(huì )有缺陷，但這個(gè)由他們自己來(lái)解決，也給使用者自己一個(gè)選擇的權利，工程師一句話(huà)往往決定一個(gè)單位的態(tài)度，但工程師一句不負責任的話(huà)往往比銷(xiāo)售人員的此類(lèi)話(huà)更有殺傷力，惡性競爭由此開(kāi)始。所以，在充分證明這個(gè)試劑就是有問(wèn)題之后，這個(gè)廠(chǎng)家其他批號呢？是否換試劑由使用者自己選擇，相信很多都是你還沒(méi)開(kāi)口人家就會(huì )問(wèn)你，你有沒(méi)有這個(gè)試劑，不行用你的吧。呵呵，所以不需要很著(zhù)急，把活兒做好把過(guò)程和結論以及原因闡述準確經(jīng)得起推敲，這才是工程師的根本，至于后面的生意那都是水到渠成的事情。
